Optimizing Gel Electrophoresis: Faʻataʻitaʻiga Sili mo Faʻataʻitaʻiga Volume, Voltage, ma Taimi

Folasaga

Gel electrophoresis o se metotia faʻavae i le biology mole, faʻaaogaina lautele mo le vavaeeseina o polotini, nucleic acids, ma isi macromolecules. O le pulea lelei o le volume sample, voltage, ma le electrophoresis taimi e taua tele mo le ausiaina o taunuuga saʻo ma toe gaosia.O lo'o ofo mai e le matou paaga faigaluegafa'ata'ita'iga sili ona lelei mo le fa'atonutonuina o nei ta'iala ile SDS-PAGE gel electrophoresis.

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Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis oloa

Fa'ata'ita'iga Volume: Fa'amautinoa le Tulaga Fa'atasi

A fa'atino SDS-PAGE electrophoresis, o le fa'ata'ita'iga voluma ose mea taua e mafai ona matua a'afia ai le fa'ai'uga o au fa'ai'uga. E masani ona fautuaina e uta le 10 µL o le porotini atoa i le vaieli. Ina ia mautinoa le tumau ma puipuia le faʻasalalauina o faʻataʻitaʻiga i le va o vaieli lata ane, e taua le utaina o se voluma tutusa o le 1x faʻapipiʻi paʻu i soʻo se vaieli gaogao. O lenei puipuiga e fesoasoani e puipuia ai le salalau o faʻataʻitaʻiga i auala tuaoi, lea e mafai ona tupu pe a tuʻu le vaieli e gaogao.

A'o le'i utaina au fa'ata'ita'iga, amata i taimi uma i le fa'aopoopoina o se fa'ailoga mole mole mamafa i le tasi vaieli. O lenei mea e mafai ai ona faigofie ona iloa le tele o polotini pe a uma le electrophoresis.

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Pulea Voltage: Paleni Saosaoa ma I'uga

O le voltage faʻaaogaina i le taimi o le electrophoresis e aʻafia saʻo uma ai le saoasaoa lea e faimalaga ai faʻataʻitaʻiga e ala i le gel ma le iuga o le teteʻa. Mo SDS-PAGE, e fautuaina e amata i se eletise maualalo e tusa ma le 80V. O lenei la'asaga maualalo muamua e mafai ai e fa'ata'ita'iga ona feoa'i lemu ma tutusa, fa'apipi'i i totonu o se pa'u ma'ai a'o latou ulu atu i le gel vavae.

O le taimi lava e ulufale ai faʻataʻitaʻiga i le gel vavae ese, e mafai ona faʻateleina le voltage i le 120V. O lenei voltage maualuga e faatelevaveina ai le femalagaiga, faʻamautinoa o loʻo faʻamavae lelei le polotini e tusa ai ma o latou mamafa mole. E taua le mataʻituina o le alualu i luma o le lanu lanumoana bromophenol i luma, lea e faʻaalia ai le maeʻa o le electrophoresis. Mo gels faʻatasi ma le faʻatonuga o le 10-12%, 80-90 minute e masani lava ona lava; ae ui i lea, mo le 15% gels, atonu e te manaʻomia le faʻalauteleina o le taimi taʻavale.

Pulea Taimi: Iloa Le Taimi e Taofi ai

Ole taimi ole isi mea taua ile electrophoresis gel. O le taʻavaleina o le gel mo se taimi umi pe puʻupuʻu e mafai ona taʻitaʻia ai le vavae ese. O le femalagaiga o le lanu lanumoana bromophenol o se faʻailoga aoga: pe a oʻo i le pito i lalo o le gel, e masani lava o le taimi e taofi ai le tamoe. Mo gels masani, pei ole 10-12%, ole umi ole electrophoresis e tusa ma le 80-90 minute e masani lava ona lava. Mo gels pasene maualuga, pei o le 15%, e tatau ona faʻalautele le taimi taʻavale ina ia mautinoa le vavaeeseina atoatoa o polotini.

Puleaina o Paleni: Toe Fa'aaoga ma Saunia Pa'u

E mafai ona toe fa'aoga 1-2 taimi, fa'alagolago ile tulaga fa'apitoa a lau falesu'esu'e. Ae ui i lea, mo faʻaiʻuga sili ona lelei, e fautuaina e saunia fou 10x buffer ma faʻafefeteina aʻo leʻi faʻaaogaina. O lenei mea e faʻamautinoa ai o loʻo faʻatumauina e le paʻu lona aoga, e taʻitaʻia ai iʻuga e sili atu ona faʻatuatuaina electrophoresis.

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Beijing Liuyi Biotechnology gel electrophoresis oloa

E ala i le pulea lelei o le voluma faʻataʻitaʻiga, voltage, ma le electrophoresis taimi, e mafai ona e faʻaleleia atili le saʻo ma le toe gaosia o au gel electrophoresis iʻuga. O le fa'atinoina o nei faiga sili i lau galuega su'esu'e o le a fesoasoani ia te oe e maua ai fa'amau manino ma ma'oti, e o'o atu ai i fa'amaumauga sili atu mo su'esu'ega i lalo.

Afai e tele au metotia lelei e faʻamaonia ai le suʻega electrophoresis gel, faʻafeiloaʻi e talanoa ma i matou!

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Taimi meli: Aukuso-20-2024